Tuotteet

1.Tutkii, voiko adenosiinidifosfaatista (ADP) johdettu adenosiini estää verihiutaleiden aggregaatiota, erityisesti P2Y12-antagonistin läsnä ollessa, jolloin ADP:n vaikutukset P2Y12-reseptoriin estyisivät. Verihiutaleiden aggregaatio mitattiin vasteena trombiinireseptorin aktivaattorille peptidi verihiutaleiden laskennalla verihiutalerikkaassa plasmassa (PRP) ja kokoveressä ADP:n ja P2Y12-antagonistien cangrelorin, prasugreelin aktiivisen metaboliitin ja tikagrelorin läsnä ollessa.P2Y12-antagonistin läsnä ollessa PRP:n esi-inkubointi ADP:n kanssa esti aggregaatiota;adenosiinideaminaasi poisti tämän vaikutuksen.Kokoveressä ei esiintynyt aggregaation estoa paitsi silloin, kun dipyridamolia lisättiin estämään adenosiinin ottoa punasoluihin.ADP:n vaikutukset PRP:ssä ja kokoveressä toistettiin käyttämällä adenosiinia ja ne liittyivät suoraan cAMP:n muutoksiin (arvioitu verisuonia laajentavalla fosfoproteiinin fosforylaatiolla).Kaikki tulokset olivat samat riippumatta käytetystä P2Y12-antagonistista. ADP estää verihiutaleiden aggregaatiota P2Y12-antagonistin läsnä ollessa muuntamalla adenosiiniksi.Estoa esiintyy PRP:ssä, mutta ei kokoveressä, paitsi jos adenosiinin sisäänotto on estetty.Yksikään tutkituista P2Y12-antagonisteista ei toistanut dipyridamolin vaikutuksia suoritetuissa kokeissa.

2. ADP:tä pidetään heikkona verihiutaleiden agonistina, koska se indusoi rajoitetusti aggregaatiovasteita in vitro solunulkoisen Ca(2+) [(Ca(2+))(o)] fysiologisissa pitoisuuksissa.[Ca(2+)](o):n alentaminen parantaa paradoksaalisesti ADP:n aiheuttamaa aggregaatiota, jonka on katsottu johtuvan lisääntyneestä tromboksaani A(2):n tuotannosta.Tässä tutkimuksessa tutkittiin ektonukleotidaasien roolia verihiutaleiden aktivaation [Ca(2+)](o)-riippuvuudessa.[Ca(2+) ](o):n vähentäminen millimolaarisista mikromolaarisista tasoista muutti ADP:n (10 μmol/l) aiheuttaman verihiutaleiden aggregaation väliaikaisesta jatkuvaksi vasteeksi sekä verihiutalepitoisessa plasmassa että pestyissä suspensioissa.Tromboksaani A(2)-tuotannon estäminen aspiriinilla ei vaikuttanut tähän [Ca(2+)](o)-riippuvuuteen.ADP:n hajoamisen estäminen poisti erot alhaisen ja fysiologisen [Ca(2+) ](o):n välillä, mikä johti vahvaan ja jatkuvaan aggregaatioon molemmissa olosuhteissa.Solunulkoisen ADP:n mittaukset paljastivat vähentyneen hajoamisen sekä plasmassa että apyraasia sisältävässä suolaliuoksessa mikromolaarisella tasolla verrattuna millimolaariseen [Ca(2+)](o) .Kuten aiemmin on raportoitu, tromboksaani A(2)-tuotanto lisääntyi alhaisella [Ca(2+)](o) -arvolla, mutta tämä oli riippumaton ektonukleotidaasiaktiivisuudesta(.) P2Y-reseptoriantagonistit cangrelor ja MRS2179 osoittivat P2Y(12)-reseptoreiden tarpeellisuuden. jatkuvalle ADP:n aiheuttamalle aggregaatiolle, vähäinen rooli P2Y:lle(1) .Yhteenvetona voidaan todeta, että Ca(2+)-riippuvainen ektonukleotidaasiaktiivisuus on päätekijä, joka määrää verihiutaleiden aggregoitumisen ADP:ksi, ja sitä on valvottava P2Y-reseptorin aktivaatiotutkimuksissa.