Tuotteet

Kehitimme uuden pienen häiritsevän RNA:n (siRNA) kuljetusjärjestelmän käyttämällä kolmiosaista kompleksia polyetyleeni-imiinin (PEI) ja y-polyglutamiinihapon (γ-PGA) kanssa, joka osoitti vaimentavaa vaikutusta eikä sytotoksisuutta.siRNA:n binaariset kompleksit PEI:n kanssa olivat noin 73-102 nm partikkelikoossa ja 45-52 mV ζ-potentiaalissa.SiRNA/PEI-kompleksien hiljentävä vaikutus lisääntyi PEI:n lisääntyessä, ja siRNA/PEI-kompleksit, joiden varaussuhde oli suurempi kuin 16, osoittivat merkittävää lusiferaasin kaatumista hiiren paksusuolenkarsinoomasolulinjassa, joka ekspressoi säännöllisesti lusiferaasia (Colon26/Luc-solut).Kuitenkin voimakasta sytotoksisuutta ja veren agglutinaatiota havaittiin siRNA/lipofektamiinikompleksissa ja siRNA/PEI16-kompleksissa.Kationisten kompleksien lataamisen anionisella yhdisteellä raportoitiin olevan lupaava menetelmä näiden toksisuuksien voittamiseksi.Siksi valmistimme siRNA:n kolmikomponentteja PEI:n kanssa (varaussuhde 16) lisäämällä y-PGA:ta sytotoksisuuden vähentämiseksi ja siRNA:n kuljettamiseksi.Kuten odotettiin, ternääristen kompleksien sytotoksisuus väheni y-PGA-pitoisuuden lisääntyessä, mikä pienensi kompleksien ζ-potentiaalia.siRNA/lipofektamiinikompleksiin verrattavissa oleva voimakas hiljentävä vaikutus havaittiin kolmikomponenteista komplekseista, jotka sisältävät y-PGA:ta anionisella pintavarauksella.Kolmikomponenttien korkea liittyminen Colon26/Luc-soluihin varmistettiin fluoresenssimikrokopiolla.Kun eksogeenisesti transfektoidun geenin kaatuminen oli saavutettu, kompleksin kyky välittää endogeenisen taloudenhoitogeenin, glyseraldehydi-3-fosfaattidehydrogenaasin (GAPDH) tuhoamista, arvioitiin B16-F10-soluissa.Kolmikomponenttikompleksi (siRNA/PEI16/y-PGA12-kompleksi) osoitti merkittävää GAPDH-knockdown-vaikutusta.Näin ollen kehitimme hyödyllisen siRNA-kuljetusjärjestelmän.