ONPG CAS:369-07-3 98,0 % min valkoisesta luonnonvalkoiseen jauheeseen
| Luettelonumero | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| tuotteen nimi | ONPG (2-nitrofenyyli-beeta-D-galaktopyranosidi) |
| Molekyylikaava | C12H15NO8 |
| Molekyylipaino | 301,25 |
| Tallennustiedot | 2-8 °C |
| Yhdenmukaistettu tariffikoodi | 29400000 |
Tuotteen tiedot
| Puhtaus (HPLC) | Min.98,0 % |
| Ulkomuoto | Valkoinen tai luonnonvalkoinen jauhe |
| Ratkaisu(1 % vedessä) | Kirkas, väritön tai hieman kellertävä liuos |
| Vesipitoisuus(Karl Fisher) | Max.0,5 % |
| Optinen ominaiskierto [α]D20 (c=1, H2O) | -65,0 °C - -73,0 °C |
Keskustelu ONPG-testistä (β-galaktosidaasitesti)
Viime aikoina on herännyt usein kysymyksiä: 1. Miksi ONPG-testiä voidaan käyttää erottamaan viivästynyt laktoosin käyminen?2. Miksi kansallisessa standardissa sanotaan, että ONPG-testissä on käytettävä 3 % natriumkloriditrisakkaridirautaa (tai trisakkaridirautaa)?3. Miksi Vibrio parahaemolyticukselle OPNG-testiä suoritettaessa pitäisi lisätä tolueenia tipoittain standardin mukaan?Mikä on toiminto?
Yrityksemme on tarkistanut paljon tietoa, tehnyt niistä yhteenvedon ja jakanut sen kanssasi alla:
Periaate: ONPG:n kiinalainen nimi on o-nitrobentseeni-β-D-galaktopyranosidi.ONPG voidaan hydrolysoida galaktoosiksi ja keltaiseksi o-nitrofenoliksi (ONP) β-galaktosidaasilla, joten β-galaktosidaasin aktiivisuus voidaan havaita viljelyalustan värinmuutoksella.
Laktoosi on sokeri, joka useimpien mikro-organismien on tunnistettava.Sen aineenvaihdunta vaatii kahta entsyymiä, joista toinen on solupermeaasi, laktoosi pääsee soluihin permeaasin vaikutuksesta;toinen on β-galaktosidaasi, joka hydrolysoi laktoosin galaktoosiksi.Laktoosi ja glukoosi.β-galaktosidaasi voi myös vaikuttaa suoraan ONPG:hen hydrolysoidakseen sen galaktoosiksi ja keltaiseksi o-nitrofenoliksi (ONP).Se voidaan tehdä 24 tunnissa, jopa laktoosiviivästetyillä fermenteillä.Siksi se selittää havaintotulokset viljelmän 1 poimimisesta agar-vinolta ja sen ympistämisestä täydessä ympyrässä 36 °C:ssa 1-3 tunnin ja 24 tunnin ajan.Jos β-galaktosidaasia tuotetaan, se kellastuu 1-3 tunnissa, jos sellaista entsyymiä ei ole, se ei muuta väriä 24 tunnissa.
Edellä olevien kahden entsyymin mukaan mikro-organismit voidaan jakaa seuraaviin luokkiin:
1 laktoosia fermentoiva (18-24 tuntia) bakteeri, jossa on permeaasi ja β-galaktosidaasi P + G +;
2 Viivästyneet laktoosifermentoijat (kesto yli 24 tuntia), joista puuttuu permeaasi, mutta joissa on galaktosidaasi: P-G+.
3 Ei-laktoosifermentoijat, joista puuttuu sekä permeaasi että galaktosidaasi: P-G-.
ONPG-testiä voidaan käyttää erottamaan laktoosi-lag-fermentoivat bakteerit (P-G+) ei-fermentoivista laktoosibakteereista (PG-), kuten:
1 Erota myöhäiset laktoosifermentoijat (P-G+) laktoosittomista fermentoreista (P-G-).
(a) Citrobacter (+) ja Salmonella arizonae (+) Salmonellasta (-).
(b) Escherichia coli (+) Shigella sonneista (-).
Miksi ONPG-määritys suoritettiin yön yli viljelmällä 3-prosenttisella natriumkloridiferritrisakkaridilla (rautatrisakkaridilla)?Yrityksemme on kuullut paljon tietoa, mutta selkeää lausuntoa ei ole.Ainoastaan FDA:n verkkosivustolla on kirjoitettu, että "Inokuloi testattavat viljelmät kolmoissokerirauta-agar-vinopinnoille ja inkuboi 18 tuntia 37 °C:ssa (tai muussa sopivassa lämpötilassa, jos tarpeen). Myös laktoosiprosenttia voidaan käyttää."tarkoittaa: testibakteerit siirrostettiin trisakkaridirautaelatusaineeseen ja viljeltiin 37 °C:ssa 18 tuntia.Ravinneagar vinot (tai muut) alustat, jotka sisältävät 1 % laktoosia, ovat myös hyväksyttäviä.Tästä syystä päätellään, että trisakkaridirautaväliaine sisältää laktoosia.Yön yli kasvamisen jälkeen bakteerit ovat tuottaneet hyvää aktiivista β-galaktosidaasia.Tällaisia bakteereja käyttämällä p-galaktosidaasi voi hajottaa ONPG:n nopeammin.Kokeellinen ilmiö näkyy nopeammin ja paremmin.Lisäksi tolueenin tipoittainen lisääminen ja vesihaude 5 minuutin ajan ovat kaikki β-galaktosidaasin vapauttamiseksi.
