Tuotteet

Tämä tutkimus kuvaa yksinkertaista ja tehokasta menetelmää, jossa käytetään korkean erotuskyvyn nestekromatografiaa (HPLC) yhdistettynä fluoresenssidetektioon hermokudoksen glutamaatin oton kineettisten parametrien määrittämiseksi.7 päivän ikäisistä poikasista saatua verkkokalvokudosta inkuboitiin tunnettujen glutamaattipitoisuuksien (50-2000 µM) kanssa 10 minuuttia, ja o-ftaldehydillä (OPA) derivatisoidun välittäjäaineen tasot inkubointiväliaineessa mitattiin.Arvioimalla glutamaatin alku- ja loppupitoisuuksien välistä eroa väliaineessa karakterisoitiin kyllästyvän oton mekanismi (K(m) = 8,2 ja V(max) = 9,8 nmol/mg proteiinia/min).Tämä mitta oli suurelta osin riippuvainen natriumista ja lämpötilasta, mikä tukee vahvasti sitä, että korkean affiniteetin kuljettajat ottavat todellakin pitoisuuden pienenemismekanismin.Tämän lisäksi tuloksemme osoittivat myös, että sinkkikloridi (glutamaatti/aspartaattikuljettajien inhibiittori) aiheutti pitoisuudesta riippuvaisen laskun glutaamin otossa, mikä osoittaa metodologiamme spesifisyyden.Kaiken kaikkiaan tämä työ luonnehtii vaihtoehtoista menetelmää glutamaatin oton arvioimiseksi hermokudoksessa käyttämällä HPLC:tä.Tämä lähestymistapa voisi olla tärkeä työkalu tutkimuksissa, jotka liittyvät keskushermoston vaurioihin liittyvien pienten muutosten karakterisointiin glutamaatin kuljetuksessa.