X-GAL CAS:7240-90-6 98 % valkoinen tai luonnonvalkoinen kiteinen jauhe
| Luettelonumero | XD90008 |
| tuotteen nimi | X-Gal (5-bromi-4-kloori-3-indolyyli-beeta-D-galaktopyranosidi) |
| CAS | 7240-90-6 |
| Molekyylikaava | C14H15BrClNO6 |
| Molekyylipaino | 408,63 |
| Tallennustiedot | -2 - -6 °C |
| Yhdenmukaistettu tariffikoodi | 29400000 |
Tuotteen tiedot
| Ratkaisun ulkonäkö | Kirkas, väritön tai vaaleankeltainen liuos (50 mg/ml DMF:MeOH:ssa, 1:1) |
| Erityinen optinen kierto | -61,5 +/- 1 |
| Ulkomuoto | Valkoinen tai luonnonvalkoinen kiteinen jauhe |
| Puhtaus HPLC | min 99 % |
| Liukoisuus (5 % DMF:ään) | Liukoinen (5 % w/v, DMF) |
| Vesi KF | enintään 1 % |
| Määritys (HPLC vedettömällä pohjalla) | min 98 % w/w |
X-galin käyttötarkoitukset
X-gal (lyhennetty myös BCIG:ksi 5-bromi-4-kloori-3-indolyyli-β-D-galaktopyranosidista) on orgaaninen yhdiste, joka koostuu galaktoosista, joka on liitetty substituoituun indoliin.Yhdisteen syntetisoi Jerome Horwitz ja sen yhteistyökumppanit vuonna 1964. Muodollinen kemiallinen nimi on usein lyhennetty epätarkemmiksi, mutta myös vähemmän raskaiksi lauseiksi, kuten bromikloori-indoksyyligalaktosidi.Indoksyylistä peräisin oleva X voi olla X:n lähde X-gal-supistuksessa.X-galia käytetään usein molekyylibiologiassa entsyymin, β-galaktosidaasin, läsnäolon testaamiseen sen tavallisen kohteen, β-galaktosidin, tilalla.Sitä käytetään myös tämän entsyymin aktiivisuuden havaitsemiseen histokemiassa ja bakteriologiassa.X-gal on yksi monista indoksyyliglykosideista ja estereistä, jotka tuottavat liukenemattomia sinisiä yhdisteitä, jotka ovat samanlaisia kuin indigoväri entsyymikatalysoidun hydrolyysin seurauksena.
X-gal on laktoosin analogi, ja siksi sen voi hydrolysoida β-galaktosidaasientsyymi, joka katkaisee D-laktoosin p-glykosidisidoksen.X-gal, kun β-galaktosidaasi pilkkoo, tuottaa galaktoosia ja 5-bromi-4-kloori-3-hydroksi-indolia - 1. Jälkimmäinen dimeroituu sitten spontaanisti ja hapettuu 5,5'-dibromi-4,4'-diklooriksi -indigo - 2, voimakkaan sininen tuote, joka on liukenematon.X-gal itsessään on väritön, joten sinisen värisen tuotteen läsnäoloa voidaan siksi käyttää aktiivisen β-galaktosidaasin esiintymisen testissä.Tämä mahdollistaa myös bakteeriperäisen β-galaktosidaasin (niin kutsuttu lacZ) käytön reportterina erilaisissa sovelluksissa.
Kaksihybridianalyysissä β-galaktosidaasia voidaan käyttää reportterina tunnistamaan proteiineja, jotka ovat vuorovaikutuksessa toistensa kanssa.Tässä menetelmässä genomikirjastoja voidaan seuloa proteiinivuorovaikutuksen suhteen käyttämällä hiivaa tai bakteerijärjestelmää.Kun seulottavien proteiinien välillä on onnistunut vuorovaikutus, se johtaa aktivaatiodomeenin sitoutumiseen promoottoriin.Jos promoottori on liitetty lacZ-geeniin, β-galaktosidaasin tuotanto, joka johtaa sinipigmentoituneiden pesäkkeiden muodostumiseen X-gal:n läsnä ollessa, osoittaa siksi onnistuneen vuorovaikutuksen proteiinien välillä.Tämä tekniikka voidaan rajoittaa alle noin 106:n kokoisten kirjastojen seulomiseen. X-gal:n onnistunut pilkkominen aiheuttaa myös huomattavan likaisen hajun indolin haihtumisesta johtuen.
Koska X-gal itsessään on väritön, sinisenvärisen tuotteen läsnäoloa voidaan käyttää testinä aktiivisen β-galaktosidaasin esiintymisen toteamiseksi.
Tämä aktiivisen entsyymin helppo tunnistaminen mahdollistaa β-galaktosidaasin geenin (lacZ-geenin) käytön reportterigeeninä erilaisissa sovelluksissa.
