Tuotteet

Hiilihappoanhydraasiaktivaattorit: ensimmäinen ihmisen erittävän isoformin VI aktivaatiotutkimus aminohappojen ja amiinien kanssa.

Ihmisen hiilihappoanhydraasin (hCA, EC 4.2.1.1) erittävä isotsyymi, hCA VI, on kloonattu, ekspressoitu ja puhdistettu bakteeriekspressiojärjestelmässä.CO(2)-hydraatioreaktion kineettiset parametrit osoittivat hCA VI:n ak(cat) 3,4 x 10(5)s(-1) ja k(cat)/K(M) 4,9 x 10(7)M (-1)s(-1) (pH:ssa 7,5 ja 20 °C:ssa).hCA VI:lla on merkittävä katalyyttinen aktiivisuus fysiologiselle reaktiolle, joka on samaa suuruusluokkaa kuin kaikkialla esiintyvä isoformi CA I tai transmembraaninen, kasvaimeen liittyvä isotsyymi CA IX.Sarjan aminohappoja ja amiineja osoitettiin toimivan CA VI:n aktivaattoreina vaihtelevilla tehoilla.l-His, l-Trp ja dopamiini osoittivat heikkoja CA VI:ta aktivoivia vaikutuksia (K(A)s alueella 21-42 mikroM), kun taas d-His, d-Phe, l-DOPA, l-Trp, serotoniini , ja jotkin pyridyylialkyyliamiinit olivat parempia aktivaattoreita K(A)-arvojen ollessa 13-19 mikroM.Parhaat CA VI -aktivaattorit olivat l-Phe, d-DOPA, l-Tyr, 4-amino-l-Phe ja histamiini, joiden K(A)s oli välillä 1,23-9,31 mikroM.Kaikki nämä aktivaattorit tehostavat k(cat), joilla ei ole vaikutusta K(M)-arvoon, osallistuen siten katalyyttisen syklin nopeuden määräävään vaiheeseen, protoninsiirtoreaktioihin entsyymin aktiivisen kohdan ja ympäristön välillä.