uutiset

Ympärillämme on monia laulamattomia sankareita, jotka näyttävät olevan tavallisia, mutta itse asiassa he antavat meille hiljaisen panoksensa.Proteinaasi K on "sanomaton sankari" molekyylidiagnostiikkateollisuudessa, vaikka alan "suuriin ja voimakkaisiin" verrattuna proteinaasi K on niin hillitty, että olemme pitkään unohtaneet sen merkityksen.Uuden kruunuepidemian puhjettua proteinaasi K:n kysyntä on noussut huimasti, ja tarjonta kotimaassa ja ulkomailla on jäänyt kauas kulutukseen, ja kaikki yhtäkkiä ymmärsivät, että proteinaasi K on niin tärkeä.
Mikä on proteinaasi K:n käyttö
Proteinaasi K on seriiniproteaasi, jolla on proteolyyttistä entsyymiaktiivisuutta ja joka voi ylläpitää aktiivisuutta monenlaisissa ympäristöissä (pH (4-12,5), runsaasti suolaa sisältävä puskuri, korkea lämpötila 70 °C jne.).Lisäksi SDS, urea, EDTA, guanidiinihydrokloridi, guanidiini-isotiosyanaatti jne. eivät estä proteinaasi K:n aktiivisuutta, ja tietty määrä pesuainetta voi myös lisätä proteinaasi K:n aktiivisuutta. Lääkehoidossa (virus- ja mikrobidesinfiointi) ), ruoka (lihan murentaminen), nahka (hiusten pehmentäminen), viininvalmistus (alkoholin selkeytys), aminohappovalmistus (hajoaneet höyhenet), nukleiinihappouutto, in situ -hybridisaatio jne., proteinaasi K Sovelluksia on.Yleisimmin käytetty sovellus on nukleiinihappouutto.
Proteinaasi K voi entsymolysoida kaikenlaisia ​​näytteessä olevia proteiineja, mukaan lukien nukleiinihappoihin tiukasti sitoutuneet histonit, jotta nukleiinihapot voidaan vapauttaa näytteestä ja vapautua uutteeseen, mikä helpottaa uutta uuttamis- ja puhdistusvaihetta.Viruksen nukleiinihapon havaitsemisessa proteinaasi K on yksi tärkeimmistä komponenteista virusnäyteliuoksessa.Proteinaasi K voi murtaa ja inaktivoida viruksen kuoriproteiinin, mikä on turvallisempaa kuljetus- ja havaitsemisvaiheessa;lisäksi proteinaasi K voi myös hajottaa RNaasi estää viruksen RNA:n hajoamisen ja helpottaa nukleiinihappojen havaitsemista.
Proteinaasi K:n yhden yön maine
Olipa kyse tieteellisen tutkimuksen tai IVD:n alalla, nukleiinihappojen uuttaminen on peruskoe, joten proteinaasi K on aina ollut erittäin tärkeä olemassaolo.Kuitenkin aiemmin proteinaasi K oli paljon vähemmän tunnettu kuin sen rooli.Suuri osa tästä johtui siitä, että proteinaasi K:n kysynnän ja tarjonnan suhde oli erittäin vakaa.Harvat ihmiset uskovat, että proteinaasi K:n saanti olisi ongelma.
Uuden kruunuepidemian puhkeamisen myötä nukleiinihappotestausten kysyntä on kasvanut.Kesäkuun 2020 loppuun mennessä Kiina on suorittanut lähes 90 miljoonaa uutta kruunutestiä, ja tämä luku on maailmanlaajuisesti vielä hälyttävämpi.Nukleiinihappouuttokokeissa proteinaasi K:n työpitoisuus on noin 50-200 μg/ml.Yleensä nukleiinihapponäytteen uuttamiseen kuluu noin 100 μg proteinaasi K:ta.Varsinaisessa käytössä nukleiinihapon uuton tehokkuuden lisäämiseksi Proteinase K:ta käytetään usein lisääntynyt määrä.Uuden koronaviruksen nukleiinihappojen havaitseminen on tuonut suuren määrän proteinaasi K:n kysyntää.Proteinaasi K:n alkuperäinen kysynnän ja tarjonnan tasapaino murtui nopeasti, ja proteinaasi K:stä tuli yhdessä yössä tärkeä epidemian ehkäisymateriaali.
Vaikeudet proteinaasi K:n tuotannossa
Vaikka epidemian edetessä ihmiset ovat arvostaneet proteinaasi K:n tärkeää arvoa, on noloa, että proteinaasi K:n liiallisen hillityksen vuoksi vain harvat kotimaiset yritykset ovat olleet mukana proteinaasi K:n tuotannossa. Haluavat saada aikaan proteinaasi K:n tuotannon Tuotantoprosessin aikana havaittiin, että proteinaasi K on erittäin erityinen proteiini.Proteinaasi K:n tuotantokapasiteetin laajentaminen lyhyessä ajassa on äärimmäisen haastavaa.
Proteinaasi K:n laajamittainen tuotanto kohtaa seuraavat vaikeudet
1. Matala ilme
Proteinaasi K voi epäspesifisesti hajottaa useimpia proteiineja ja aiheuttaa vakavaa toksisuutta ilmentymisisäntäsolulle.Siksi proteinaasi K:n ilmentymistaso on yleensä hyvin alhainen.Proteinaasi K:tä voimakkaasti ekspressoivien ilmentämisjärjestelmien ja kantojen seulonta vaatii yleensä pidemmän syklin.
2. Pigmenttien ja nukleiinihappojen jäämät
Laajamittainen käyminen tuo mukanaan suuren määrän pigmentti- ja isäntänukleiinihappojäännöksiä.Näitä epäpuhtauksia on vaikea poistaa yksinkertaisella puhdistusprosessilla, ja monimutkainen puhdistus lisää kustannuksia ja vähentää talteenottonopeutta.
3. Epävakaus
Proteinaasi K ei ole tarpeeksi stabiili, se voi entsymolysoida itsensä ja sitä on vaikea säilyttää stabiilisti 37°C:ssa pitkään ilman suoja-ainetta.
4. Helppo saostaa
Proteinaasi K:n pakastekuivattua jauhetta valmistettaessa, jotta varmistetaan, että proteinaasi K:n kiintoainepitoisuus pakastekuivatussa jauheessa on suuri, on tarpeen lisätä pakastekuivattua suoja-ainetta korkeana pitoisuutena, mutta kun proteinaasi K:n pitoisuus saavuttaa 20mg/ml ja yli, se on helppoa Aggregoituminen muodostaa sakan, mikä tuo suuria vaikeuksia korkean kiintoainepitoisuuden omaavan proteinaasi K:n pakastekuivaukseen.
5. Suuri investointi
Proteinaasilla K on voimakas proteaasiaktiivisuus ja se voi hydrolysoida muita proteaaseja laboratoriossa.Siksi proteinaasi K vaatii erikoistuneita tuotantoalueita, laitteita ja henkilöstöä tutkimukseen, kehitykseen ja tuotantoon.
XD BIOCHEMin proteinaasi K -liuos
XD BIOCHEM has a mature protein expression and purification platform, and has rich experience in the expression and purification of recombinant proteins and optimization of production processes. Through the rapid formation of a research and development team, the large-scale production process of proteinase K has been overcome. The monthly output of freeze-dried powder is more than 30 KG. The product has stable performance, high enzyme specific activity, and no host cytochrome and nucleic acid residues. Welcome to contact XD BIOCHEM Obtain a trial package (E-mail: sales@xdbiochem.com Tel: +86 513 81163739).
XD BIOCHEMin teknisiä ratkaisuja ovat mm
Käyttämällä monikopioista plasmidiintegraatiota valitaan korkean ilmentymisen kannat, joiden ilmentymistaso on 8 g/l, mikä voittaa proteinaasi K:n alhaisen ilmentymistason ongelman;
Monivaiheisen puhdistusprosessin perustamisen kautta proteinaasi K:n isäntäsytokromi- ja nukleiinihappotähteet poistettiin onnistuneesti alle standardiarvon;
Suojaavien puskuriformulaatioiden tehokkaalla seulonnalla valittiin puskuri, joka pystyy säilyttämään proteinaasi K:n stabiilisti 37 °C:ssa;
Seulontapuskurit ratkaisevat ongelman, että proteinaasi K on helppo aggregoitua ja saostaa korkeissa pitoisuuksissa, ja luo perustan proteinaasi K:n korkean kiintoainepitoisuuden pakastekuivaukselle.

XD BIOCHEM proteinaasi K -näyte

XD BIOCHEM proteinaasi K -stabiilisuustesti: aktiivisuudessa ei tapahdu merkittävää muutosta 80 päivän jälkeen huoneenlämpötilassa

XD BIOCHEM proteinaasi K -stabiilisuustesti: aktiivisuudessa ei tapahdu merkittävää muutosta 80 päivän jälkeen huoneenlämpötilassa

XD BIOCHEM proteinaasi K:n ja kilpailevien tuotteiden nukleiinihappouuttovaikutuksen vertailu.Nukleiinihapon uuttoprosessissa käytetään vastaavasti XD BIOCHEMiä ja kilpailevaa proteinaasi K:ta.XD BIOCHEM proteinaasi K:n uuttotehokkuus on korkeampi ja kohdegeenin Ct-arvo pienempi.